杜鹃素对小鼠T细胞免疫抑制作用的研究

【摘要】近年来，免疫抑制剂被广泛应用于控制一些异常的免疫应答反应，如自身免疫性疾病、过敏反应和同种异体移植等。目前传统的免疫抑制药物只能改善某些异常症状，不能有效地从根本上控制疾病的发生和发展，而且大多数药物的毒副作用大、不能长期连续使用，因此，急需寻找和开发新的高效、低毒的免疫抑制药物。而中药来源广、毒性小、药价低，将其开发应用到医学临床具有广阔前景。对于中药免疫抑制剂的开发与研究，相继发现了一些具有免疫抑制作用的中药。杜鹃素是提取自杜鹃花科植物满山红中的一种二氢黄酮类中药单体，具有多种药理活性。本文分别从体内和体外两个方面来研究杜鹃素对正常BALB/c小鼠T细胞免疫功能的调节作用，并探讨其可能的作用机制。本研究在体外分离培养小鼠原代脾细胞，MTT法检测杜鹃素对细胞的毒性作用及药物对刀豆蛋白A（ConA）诱导T细胞的增殖情况；ELISA方法测定Th1、Th2细胞因子的表达水平；流式细胞术检测T细胞周期及CD4+、CD8+T细胞亚群数量的变化；Westernblotting检测杜鹃素对ConA诱导的T细胞NF-B和NFAT信号通路活化的影响。体内建立二硝基氟苯（DNFB）诱导的小鼠迟发型超敏反应（DTH）模型，以不同剂量的杜鹃素（10、20、40mg/kg）作为实验组，生理盐水为空白对照组，环磷酰胺为阳性对照组，分组腹腔注射给药，连续7d。激发36h后，断颈处死小鼠，称取左右耳片重量，计算重量差；取激发侧耳片制作石蜡切片，染色观察局部病理组织学变化；无菌分离小鼠脾细胞，检测药物对DTH小鼠T细胞增殖能力的影响。体外结果表明，安全剂量的杜鹃素能阻碍ConA诱导的脾脏T细胞进入S期从而显著抑制了T细胞的增殖反应，而对LPS诱导脾脏B细胞的增殖影响不显著；药物剂量依赖性地抑制了T细胞IL-2、IFN-γ和IL-4的分泌；降低了脾脏T细胞中CD4+T细胞亚群的比例和CD4+/CD8+T细胞的比值。此外，杜鹃素下调了T细胞中p-IB、NF-B和NFAT2在信号转导通路中的表达量。体内结果显示，杜鹃素能显著缓解过敏模型小鼠耳肿胀反应；镜检结果也证实，高剂量的杜鹃素明显减轻了由二硝基氟苯（DNFB）诱发的炎性细胞浸润程度；MTT结果显示，杜鹃素对致敏小鼠脾脏T细胞的增殖也有一定的抑制作用。综上所述，杜鹃素对小鼠T细胞具有较好的免疫抑制作用，有可能作为一种免疫抑制剂来治疗与免疫有关的疾病，其免疫抑制作用可能与阻止NF-B和NFAT信号转导通路的激活有关。
【作者】熊瑛；
【导师】杨振国；
【作者基本信息】吉林大学，基础兽医学，2014，硕士
【关键词】杜鹃素；T细胞；免疫抑制；迟发型超敏反应；

【参考文献】
[1]刘静.曲靖师范学院网络辅助教学系统设计与实现[D].云南大学,软件工程,2012,硕士.
[2]毛晓杰.SE03转子自动动平衡机校正精度的提升研究[D].哈尔滨工业大学,机械工程,2014,硕士.
[3]戚安平.基于IPA方法的地质公园环境解说系统评估研究[D].北京林业大学,旅游管理,2013,硕士.
[4]张乐华.功能化石墨烯修饰电极的制备及其生物传感应用[D].聊城大学,2014.
[5]孙江明.自由现金流与资本结构调整速度的实证研究[D].浙江工商大学,会计学,2014,硕士.
[6]宫媛.大城市生态绿地空间的保护与营造[D].天津大学,城市规划与设计,2004,硕士.
[7]李咏今.硫化橡胶在受力状态下耐热性的合理评定方法[J].特种橡胶制品.1989(04)
[8]王军.OGD对BBB体外模型中内皮细胞紧密连接蛋白及TEER的影响[D].华中科技大学,神经病学,2013,硕士.
[9]张发明,郭亚军,易平涛.基于密度算子的多阶段群体评价信息集结方法及其应用[J].控制与决策,2010,07:993-997.
[10]智晶子.重庆武隆机场场地稳定性研究[D].成都理工大学,地质工程,2011,硕士.
[11]刘婷,井元伟,姜囡,张嗣瀛.TCSC系统的自适应minimax干扰抑制控制器设计[J].控制与决策,2013,12:1894-1897.
[12]陈生婧.陕西省畜禽粪便污染及氮磷负荷时空分布特征研究[D].长安大学,环境工程,2013,硕士.
[13]田燕飞.小型三相永磁无刷直流电动机分析与设计[D].广东工业大学,电气工程（专业学位）,2014,硕士.
[14]孙夏君.大连LNG项目船舶库存路径问题研究[D].大连海事大学,交通运输工程,2014,硕士.
[15]周聪聪.网络时代传统媒体争取舆论主动权研究[D].山东师范大学,新闻与传播（专业学位）,2013,硕士.
[16]郑瑾.构件搜索Agent的设计与实现[D].中南大学,2003.
[17]于冰.论中国刑法解释中的立法原意[D].吉林大学,刑法学,2014,硕士.
[18]沈培荣,卢宗福,张中奇.粗骨料品种与特细砂高强泵送混凝土的弹性模量[J].建筑技术.1997(01)
[19]林秀娟.大部制视阈下的行政类事业单位改革研究[D].厦门大学,行政管理,2014,硕士.
[20]李元.不同急性肝损伤模型大鼠卵圆细胞生物学差异及自噬的变化[D].河北医科大学,内科学,2013,硕士.
[21]李芳.吉林省西部盐碱芦苇湿地吸收盐分和氮磷去除效果研究[D].中国科学院研究生院（东北地理与农业生态研究所）,环境工程,2014,硕士.
[22]李华.上海城市生态游憩空间格局及其优化研究[J].经济地理,2014,01:174-180.
[23]杨洪泉,李孝明,李成名.1∶25万地形图数据挖掘初探[J].测绘通报,2002,09:44-47.
[24]刘美超.中国动漫产业版权保护研究[D].河北大学,传播学,2014,硕士.
[25]刘茜.社会心态对幸福感的影响研究[D].华南理工大学,思想政治教育,2014,硕士.
[26]曾庆财.青岛啤酒薪酬激励方案探究[D].江西财经大学,会计学,2013,硕士.
[27]宋亚昆.儿童与成人第二语言习得比较及儿童第二语言教学[D].西安电子科技大学,外国语言学及应用语言学,2004,硕士.
[28]王平华,王志刚,刘春华,向康.石墨烯复合材料对ABS性能影响的研究[J].化工新型材料,2011,09:40-41+61.
[29]杨妮雪.我国农民的微博维权保障政策研究[D].华中师范大学,行政管理,2012,硕士.
[30]万艳君,王旭,赵丽,汤龙程.石墨烯/聚合物纳米复合材料:石墨烯的分散性及其与基体的界面对力学性能的影响[A].中国化学会高分子学科委员会.2013年全国高分子学术论文报告会论文摘要集——主题J：高分子复合体系[C].中国化学会高分子学科委员会:,2013:1.
[31]应有.海流能发电装置电液控制系统研究[D].浙江大学,2008.
[32]唐颖军.基于语义主题模型的图像场景分类研究[D].北京交通大学,2010.
[33]高杰.碳纤维-水泥乳化沥青砂浆加热带设计与微波除冰功能研究[D].长安大学,材料学,2014,硕士.
[34]张良.线型设计对女装风格影响的研究[D].苏州大学,艺术设计（专业学位）,2014,硕士.
[35]胡淼.船舶电力推进永磁同步电机控制系统的研究[D].大连海事大学,轮机工程,2013,硕士.
[36]王君.论人体器官移植的刑法规制[D].苏州大学,法律（专业学位）,2013,硕士.
[37]王智锋,马书根,李斌,王越超.基于能量的蛇形机器人蜿蜒运动控制方法的仿真与实验研究[J].自动化学报,2011,05:604-614.
[38]郭懿萱.鄂尔多斯盆地安塞油田三叠系延长组长7油层组沉积相及储层特征研究[D].西北大学,矿物学、岩石学、矿床学,2013,硕士.
[39]刘兆利.保障我国民营银行发展的法律制度研究[D].西北大学,金融法学（专业学位）,2014,硕士.
[40]有祥武,荣莉,马庆云,柴天佑.时序脉冲燃烧控制系统在北台厂退火炉上的应用[J].冶金自动化,1999,06:24-28.
[41]王建美.跨学科团队科研中研究生科研能力培养探究[D].复旦大学,高等教育学,2012,硕士.
[42]施豪.名人故居的保护与利用[D].安徽大学,文物与博物馆,2013,硕士.
[43]李顺平.钢丝绳金属截面积损失检测系统研究[D].天津大学,机械工程,2004,硕士.
[44]洪冰,刘士明.中厚板轧机辊道受力情况模拟分析探讨[J].一重技术.2007(02)
[45]耿雪莹.建筑物（群）对雷电电磁环境的影响[D].南京信息工程大学,雷电科学与技术,2012,硕士.
[46]张德忠.中国石油天然气总公司(CNPC)　1995年地球物理勘探活动公报[J].石油地球物理勘探,1996,05:749.
[47]唐超.公交车辆可视监控与智能调度系统的设计与实现[D].湖南大学,软件工程,2014,硕士.
[48]王志俊.基于J2EE的预算执行动态监控系统的设计与实现[D].厦门大学,软件工程,2014,硕士.
[49]宿振伟.喀喇沁左翼蒙古族自治县地名研究[D].广西师范大学,语言学及应用语言学,2013,硕士.
[50]左丽爽.长春市生态农业发展问题研究[D].吉林农业大学,农村与区域发展,2012,硕士.